細胞融合儀

歐盟生物實(shí)驗室設備與維護集團(Biologica lLaboratory Equipment, Maintenance and Service Ltd.簡(jiǎn)稱(chēng)：BLS), BLS公司是歐洲一家專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)電融合設備的廠(chǎng)家，尤其在胚胎干細胞的電融合上面更具有*的技術(shù)。BLS產(chǎn)品的用戶(hù)遍布，用我們的設備發(fā)表的文章每年多達數百篇。在CELL，NATURE以及NUCLEARACID等專(zhuān)業(yè)雜志上經(jīng)?？梢砸?jiàn)到BLS矯健的身影。其提供的大量文獻與PROTOCOL給用戶(hù)的科研工作帶來(lái)極大的方便。

核移植是將細胞核從供體轉入受體的過(guò)程。細胞核指導胚胎的發(fā)育，導致新生體安全出生。在這個(gè)過(guò)程中，電融合用于將供體細胞與受體卵細胞融合，并進(jìn)一步激活細胞分裂，形成胚胎。Meng等人(1997)將核移植技術(shù)擴展至靈長(cháng)類(lèi)動(dòng)物模型，克隆出恒猴。技術(shù)的進(jìn)步使研究人員能夠從分裂球進(jìn)展至更高分化的胚胎細胞以及靜止的胚兒細胞，作為核的供應來(lái)源。胚胎產(chǎn)生的細胞在體外培養6-13代，然后在轉入前使用血清饑餓的方法使細胞靜止。

如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是*次在1998年報告使用非老化胚成纖維細胞作為核的供體進(jìn)行核移植而產(chǎn)生綿羊克隆轉基因牛的人。IanWilmut在1996年震驚了整個(gè)世界，他從成年乳腺的細胞產(chǎn)生出*個(gè)動(dòng)物克隆——多利。使用分化的成年細胞進(jìn)行克隆的能力打開(kāi)了核移植廣泛運用的大門(mén)即基因治療的令人激動(dòng)的模式。zui近的成功事例PPLTherapeutics公司從成年體細胞克隆出豬。對于這些用途可以使用多種細胞融合樣品池及微型載玻片。

CF-150B胚胎細胞融合儀器和相關(guān)電極槽(GSS-250)專(zhuān)為哺乳動(dòng)物胚胎分裂球電融合而設計，可在電解液或非電解液中運用。一個(gè)適當導向的短電脈沖施加在早期胚胎可以溶解細胞膜，從而完成細胞質(zhì)和細胞核融合。此儀器的主要應用是產(chǎn)生小鼠四倍體胚胎產(chǎn)生和體細胞核轉移克隆。標準的雙細胞分裂期胚胎能夠迅速地融入單個(gè)細胞(單細胞分裂期四倍體胚胎)。這種四倍體胚胎可用于與遺傳控制小鼠胚胎干細胞(ES)聚合，從而產(chǎn)生*的ES衍生細胞胎兒(Nagyetal.,1990;NagyandRossant;1993)。

　　3、zui近，gene-trap戰略用于衍生ES胚胎聚合，此胚胎由ES四倍體細胞胚胎產(chǎn)生，從而獲取基因表達模式的直接信息

CF-150B細胞融合儀和專(zhuān)業(yè)設計的高精度電極槽一起使用。槽有三種不同的縫間隙，250µm,500µm和1000µm，型號名分別為GSS-250,GSS-500和GSS-1000。在做雙細胞期分裂球融合時(shí)，任何一種槽均可使用。如果用于克隆目的，我們推薦GSS-250。電極材料是高品質(zhì)不銹鋼的，并將其安置在一種厚玻璃中。所有這些材料具有生物安全性，無(wú)毒。

CF-150B和專(zhuān)業(yè)設計的電極夾GSH-1一起使用.此“快速夾"設計使得電極牢固夾在組織培養板(或其蓋上)。在融合過(guò)程中不會(huì )有偶然的滑動(dòng)，并且給電極線(xiàn)提供了的良好接觸。電極夾可用于三種里任何一種電極GSS-250,GSS-500orGSS-1000。

CF-150B和新型設計的聚合針DN-10一起使用.在組織培養板底部形成一個(gè)小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、ES細胞塊以及移植早期的鼠胚胎。和附件球一起使用，這些針頭更符合人體動(dòng)力學(xué)，在使用中減少手指和手的壓力。

CF-150B和聚合針頭DN-09一起使用.聚合針DN-09是zui初設計的聚合針頭，在組織培養板底部形成一個(gè)小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、干細胞以及移植早期的鼠胚胎。

如果所有參數都選擇*(*按照BLS的protocol)，融合率將高于90%，胚胎在融合過(guò)程中死亡率低于10%，并且24小時(shí)內至少80%成功融合的胚胎將成長(cháng)為健康的四細胞期胚胎。